المواد الكيميائية والإعلام المختلفة المستخدمة في مختبر علم الأحياء الدقيقة

المواد الكيميائية والإعلام المختلفة المستخدمة في مختبر علم الأحياء الدقيقة!

في المختبر ، تزرع البكتيريا على مواد غنية بالمغذيات تسمى "وسائل الإعلام". هناك أيضًا مجموعة متنوعة من الوسائط المطلوبة لاستخدامات محددة.

يتم وزن مكونات وسائل الإعلام بنسبة معينة ، مختلطة في الكمية المطلوبة من الماء وتعقيمها في الأوتوكلاف. يتم تلقيح البكتيريا في ذلك وتسمح بالنمو.

وزن مكونات وسائل الإعلام هو مهمة شاقة وبعض المكونات قد يتم تفويتها دون علم. للتغلب على هذه الصعوبة ، تتوفر الآن وسائط جاهزة في شكل مسحوق.

هذه الوسائط تحتوي على جميع المكونات في النسب المقررة. إلى كمية محددة من وسائط المسحوق (كما هو مذكور على ملصق العلبة) ، يتم إضافة كمية محددة من الماء وتعقيمها.

وسائط الثقافة هي من الأنواع التالية:

I. الإعلام المعرّف كيميائياً:

الوسائط المحددة كيميائياً أو الوسائط الاصطناعية هي الوسائط ، حيث يمكن تحديد جميع المواد الكيميائية المحددة (الجزيئات والذرات) وتركيزاتها. قد تشتمل المواد الكيميائية على H2O و NaCl و Na ₂ S0 ₄ و KCI و agar. أمثلة: مرق الاصطناعية غير العضوية ، مرق الملح الجلوكوز.

II. وسائط معقدة:

الوسائط المعقدة هي الوسائط ، حيث لا يمكن تحديد جميع المواد الكيميائية المحددة (الجزيئات والذرات) وتركيزاتها. بالنسبة للبكتيريا السريعة ، تستخدم بعض المواد المعقدة ، مثل مستخلص لحم البقر ومستخلص الخميرة والببتون في وسائل الإعلام ، التي تختلف تركيبتها الكيميائية الدقيقة (الجزيئات والذرات) بشكل كبير وغير معروفة. وتستخدم هذه الوسائط أساسا لنمو وافر من البكتيريا. أمثلة: مرق المغذيات والأجار المغذيات.

III. وسائل الإعلام المتخصصة:

وتستخدم هذه الوسائط لأغراض محددة ، وليس فقط لنمو البكتيريا.

بناءً على الغرض من الاستخدام ، فهي من الأنواع التالية:

1. وسائل الإعلام الانتقائية:

هم وسائل الإعلام التي تحتوي على تركيبة محددة من المكونات ، والتي تدعم نمو بعض البكتيريا المستهدفة ويمنع نمو الآخرين. يتم استخدامها لعزل مجموعات معينة من البكتيريا.

عندما تنمو مجموعة معينة من البكتيريا في وسط انتقائي ، فإنها تظهر خصائص مستعمرة نموذجية ، والتي تساعد في اكتشافها وتعدادها في عينات مختلفة. يتم أخذ بكتيريا ذات أهمية خاصة ، وجدت على أنها مستعمرات معزولة لإجراء المزيد من الفحوصات لتحديد الهوية المؤكدة. في بعض الأحيان ، يتم استخدام الوسائط الانتقائية أيضًا كوسائط تفاضلية.

فيما يلي أمثلة الوسائط الانتقائية:

(أ) MacConkey Agar:

يتم استخدامه لزراعة الأنواع سالبة الجرام من البكتيريا. تثبط البنفسجية البلورية المستخدمة في الوسط نمو البكتيريا موجبة الجرام ، مع السماح للنمو السلبي للجرام بالنمو.

(ب) شركة EMB Agar:

يستخدم الأوزين الميثيلين الأزرق أجار (EMB أجار) لزراعة أنواع سلبية الغرام من البكتيريا. يمنع جزئيا نمو البكتيريا إيجابية الجرام ، والتي بسببها تنمو أنواع البكتيريا سالبة الجرام في ذلك أكثر بغزارة. كما يستخدم أيضًا في تحديد شكل القولون المعوي الذي يطلق عليه Escherichia coli ، والذي ينمو على شكل مستعمرات سوداء زرقاء مع لمعان أخضر لامع.

تنمو بكتريا القولون المعوية الأخرى ، مثل الأيروباكتر ايروجين ، على أنها مستعمرات سميكة ، مخاطية ، وردية. إلى جانب هذه اللاكتوز-اللاكتوز ، تنمو أيضًا اللاكتوز-اللاكثمية ، ولكن كمستعمرات عديمة اللون ، والتي تأخذ اللون الأرجواني للوسط.

(ج) Mannitol Salt Agar:

يتم استخدامه لزراعة المكورات العنقودية. تركيز الملح المرتفع (7.5٪ كلوريد الصوديوم) الموجود في الوسط يثبط نمو معظم البكتيريا الأخرى. كما أنه يميز المكورات العنقودية إلى المكورات العنقودية التي تخمر المانيتول ، والتي تنمو مع المناطق الصفراء المحيطة بالمستعمرات والمكورات العنقودية غير المنيعة ، التي تنمو دون تغيير في اللون.

2. الوسائط التفاضلية:

هم وسائل الإعلام ، التي تنمو فيها بكتيريا مختلفة كمستعمرات ، مع خصائص بصرية مختلفة.

فيما يلي أمثلة الوسائط التفاضلية:

(أ) MacConkey Agar:

على هذا الوسط ، تنمو البكتيريا المعوية الطبيعية غير المسببة للأمراض ، وهي عبارة عن خمائر لاكتوز ، كمستعمرات حمراء ، في حين تنمو البكتيريا المعوية المسببة للأمراض ، التي هي لاكتوز غير خميرة ، كمستعمرات عديمة اللون.

(ب) أجار الدم:

الدم هو المكون المهم لهذه الوسيلة. وهو عنصر تخصيب اليورانيوم للبكتيريا مثل Streptococcus spp.

يتم استخدامه لتمييز خصائص العقديات لإنتاج أنواع مختلفة من انحلال الدم في الدم على النحو التالي:

(1) α-haemolysis:

هنا ، يحدث التدمير الجزئي لـ RBC ، مما يؤدي إلى مناطق لون أخضر حول المستعمرات بسبب تقليل الهيموجلوبين إلى methaemoglobin.

(2) ha-haemolysis:

هنا ، يحدث انحلال دموي كامل في RBC ، مما يؤدي إلى منطقة واضحة حول المستعمرات. ويحدث هذا الانحلال الدموي عن نوعين من الهيموليزينات ، وهما "streptolysin O" ، وهو عبارة عن إنزيم مستضد للأكسجين و "streptolysin S" ، وهو ليسين غير مستضد مستقر للأكسجين.

(iii) انحلال الدم:

هنا ، لا يحدث أي انحلال دموي ، مما يؤدي إلى عدم وجود منطقة حول المستعمرات.

3. وسائط النقل:

هم وسائل الإعلام المستخدمة لنقل قصيرة من البكتيريا ، خلالها النمو غير مرغوب فيه. هذه الوسائط تحتوي فقط على المخزن المؤقت والملح. لا تحتوي الوسائط على أي مصدر C و N وعوامل نمو أخرى. يمنع نمو الميكروبات.

4. إثراء وسائل الإعلام:

هم وسائل الإعلام ، التي يتم فيها إثراء النسبة النسبية للبكتيريا المستهدفة ، لأنها تحتوي على العناصر الغذائية للبكتيريا المستهدفة ، في حين أنها لا تحتوي على أي من البكتريا المستهدفة. على سبيل المثال ، يحتوي البراز على عدد منخفض جدًا من السالمونيلا والشيجيلا.

لعزلها ، يتم تربيتها أولاً في مرق سيلينايت أو مرق (GN-negative) ، حيث تنمو السالمونيلا والشيجلا فقط بغزارة ، في حين أن الآخرين لن تنمو وسوف تظل في مرحلة التأخر. ثم ، وهذا هو ما يشبه على وسائل الإعلام الصلبة للحصول على مستعمرات السالمونيلا والشيجلا.

5. وسائل الإعلام الغنية:

هم وسائل الإعلام المستخدمة لدعم نمو أنواع الحد الأقصى من البكتيريا.

6. وسائل الإعلام البيوكيميائية:

وتستخدم هذه الوسائط لاختبار الأنشطة البيوكيميائية للبكتيريا ، والتي تساعد في تحديد هويتهم. ويرد أدناه قائمة بالوسائط البيوكيميائية الهامة المستخدمة في الاختبارات البيوكيميائية المستخدمة لتحديد البكتيريا المختلفة.